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埃澤思細胞凍存液如何使用，有哪些注意事項

更新時間：2021-11-19

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　　埃澤思細胞凍存液是細胞保存的主要方法之一，利用凍存技術(shù)將細胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。

　　細胞冷凍的原理在于盡可能降低細胞內(nèi)的晶體形成，減少細胞內(nèi)水凝固所形成的高濃度溶質(zhì)對細胞造成的低溫損傷，從提高細胞復蘇時的存活率。

　　細胞凍存的數(shù)量應保證復蘇時低溫保護劑獲稀釋，稀釋后的細胞濃度扔高于正常傳代的細胞濃度為宜，這是因為當?shù)蜏乇Ｗo劑稀釋以后，該濃度一般不會對細胞造成毒性損傷。

　　細胞凍存液主要由FBS、DMSO等組成，是非常經(jīng)典的一種無菌凍存液。用于各種哺乳動物原代細胞、傳代細胞系、雜交瘤細胞等的凍存。

　　埃澤思細胞凍存液操作步驟：

　　1、培養(yǎng)細胞至對數(shù)生長晚起，顯微鏡觀察其外觀、形態(tài)、有無污染等，取狀態(tài)良好的細胞進行凍存操作。如為貼壁生長細胞，用胰蛋白酶消化并用*培養(yǎng)基終止消化，進行細胞計數(shù)；如為懸浮生長細胞，進行細胞計數(shù)。

　　2、加入適量的通用細胞凍存液，重懸細胞，使細胞濃度達到ml，置于凍存管中，密封，不要擰的太緊，避免彎曲變形。

　　3、一般進行凍存。亦可采用-20℃30min，-70℃過夜，后置于液氮罐中長期存儲。

　　埃澤思細胞凍存液注意事項：

　　1、注意在超凈工作臺內(nèi)無菌操作，盡量避免污染。

　　2、初次使用融化后可在4℃保存1個月，單應減少反復凍融的次數(shù)，以免失效。

　　3、雜交瘤細胞凍存時應定期復蘇，檢查細胞的活性和分泌抗體的穩(wěn)定性。

　　4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。